Portada » Biología » Procesamiento de Muestras y Hemocultivos
Trans comprobar que se han seguido normas de identificación, centrifugar 10 min a 3000 rpm. Observar el plasma sobrenadante, si es hiperlipémico se procesará la muestra comunicándoselo al facultativo. Si el plasma está hemolizado se comunicará al lugar de extracción que ha de enviar muestra.
La muestra de gases es sangre total venosa o arterial y viene en una jeringa de plástico heparinizada sellada con un tapón de goma, debemos homogeneizar muy bien antes de procesar la muestra.
1. Muestra insuficiente. 2. Muestra coagulada.
Tapón color morado, contiene EDTA, para realización de hemograma y reticulocitos, debe tener una cantidad exacta de 3ml para los adultos y de 0.5 ml para los pediátricos.
1. Coágulos o microcoágulos que puedan interferir en los resultados. 2. Envejecimiento de la muestra. 3. Muestra insuficiente o excesiva, ya que la cantidad debe ser exactamente de 3ml.
Tapón azul claro, citrato sódico a 1/9, debe tener cantidad exacta de muestra sanguínea de 4.5 ml para los adultos y de 1.5 ml para los pediátricos. Centrifugar 10 min a 3000 rpm. Observar plasma sobrenadante, si hiperlipémico se procesará la muestra comunicándoselo al facultativo. Si el plasma está hemolizado se comunicará al lugar de extracción que ha de enviar muestra.
1. Coágulos o microcoágulos que pueden interferir en los resultados. 2. Plasma hiperlipémico. 3. Muestra insuficiente o excesiva, ya que la cantidad debe ser exactamente de 3ml. 4. Hemólisis.
Tapón negro, citrato sódico a 1/4, debe tener cantidad exacta de muestra sanguínea de 1.2 ml.
1. Coágulos o microcoágulos que pueden interferir en la muestra. 2. Envejecimiento de la muestra. 3. Muestra insuficiente o excesiva. 4. Hemólisis.
Enzimas: La mayoría de las enzimas refrigeradas 0.4º permanecen estables, desde 2 días a 1 semana. También son estables a temperatura ambiente pero menos tiempo, si la muestra no se va a analizar en el día, se debe separar suero/plasma guardándolo en el frigorífico. – Fosfatasa alcalina: estable 2.3 días refrigerada. – Fosfatasa ácida: inestable a cualquier temperatura, a menos que el pH del suero se reduzca a 5-6 con citrato o acetato. Acidificada + refrigerada es estable 3 días. – Alanina aminotransferasa GTT estable 5 días, refrigerada. No aguanta descongelación. – Creatinina fosfoquinasa (CK) refrigerada estable 7 días.
Determinaciones de iones se suelen hacer en suero o plasma heparinizado. Bastante estable a temperatura ambiente o refrigerados, congelados se mantienen largos periodos de tiempo. Si la heparina se presenta como sal sódica afecta al análisis de Na, si este es de litio afecta a la determinación de ese ion. Los anticoagulantes que precipitan el Ca (EDTA y citratos) no se pueden usar si queremos determinar ese ion. Para determinar correctamente el ion amonio se debe recoger la sangre con oxalato potásico, EDTA o heparina.
Glucosa: Se determina en suero o plasma. Los anticoagulantes no interfieren en esta determinación. La muestra debe centrifugarse lo antes posible porque la glucosa en sangre total puede sufrir glucólisis a gran velocidad. Es estable refrigerada 3 días.
Las células sanguíneas metabolizan la glucosa o lactato, ese metabolismo depende del tiempo y de la temperatura. La determinación se hace en suero recogido en un tubo con algún inhibidor de la glucólisis. La sangre se extrae sin torniquete.
El técnico debe asegurarse de que la solicitud del análisis está bien rellenada con los datos de la dosis, forma farmacéutica, vía de administración, hora de administración de la última dosis. Se debe anotar el tiempo o los tiempos exactos de las extracciones.
Existen muchos factores, no patológicos, que pueden influir en la determinación de lípidos, una comida rica en grasas, ejercicio físico, variaciones estacionales o la ingestión de ciertas sustancias como anticonceptivos orales. Antes de la toma de muestras se debe informar al paciente de las condiciones, es importante que esté en ayunas 12 horas. El estudio se hace en suero, es importante realizarlo el mismo día para evitar cambios de composición. Si no se puede, la muestra se conserva: para colesterol total y triglicéridos aguantan hasta una semana refrigerados y más tiempo congelados. Al congelar y descongelar hay que agitar los tubos para que las muestras sean homogéneas. Para estudios de lipoproteínas no congelar porque son partículas frágiles.
Para determinaciones de rutina el suero o plasma, con EDTA o heparina, son adecuados. Se conservan muestras refrigeradas, 2-8ºC 2 días y congeladas -20ºC más tiempo. Las determinaciones basales se hacen con el paciente en ayunas.
Para el análisis de proteínas totales y cuantificación de inmunoglobulinas la conservación de la muestra se hace refrigerando durante 3-4 días o congelando si es más tiempo.
Introducción: El cultivo de sangre es el estudio microbiológico más importante y utilizado para la determinación del agente etiológico de algunas patologías. En las bacteriemias intermitentes el momento idóneo para la obtención de la muestra es lo más cerca posible del pico febril y después de aparecer los síntomas como escalofríos. Siempre que sea posible obtener la muestra antes de instaurar el tratamiento antibiótico. En caso de bacteriemias resistentes al tratamiento como la endocarditis cualquier momento es adecuado para tomar la muestra.
Los frascos disponibles para Hemocultivos en el servicio de microbiología son: Pareja de frascos de uso habitual en adultos y niños grandes. Frasco aerobio volumen del inóculo 5 a 10 cc tapón azul. Frasco anaerobio volumen del inóculo 5 a 10 cc tapón rojo. Frasco único pediátrico volumen del inóculo 1 a 4 cc tapón amarillo. A veces en niños pequeños neonatos, prematuros y lactantes es suficiente con 0.5 cc.
**/El numero de muestras de sangre depende del cuadro clínico. En general se considera idóneo la obtención de tres hemocultivos seriados aerobio y anaerobio con un intervalo de 30 minutos entre las extracciones.**/El volumen de sangre a cultivar y el intervalo entre tomas son un factor importante en la determinación de microorganismos pero a veces estos serán menores por las características del paciente porque urge instaurar tratamiento antibiótico.**/Inocularemos el volumen recomendado por el fabricante en cada tipo de frasco.**/Mantener asepsia estricta durante todo el proceso para que los resultados sean fiables, obteniendo cada muestra de lugares de venopunción diferentes implicando a otro profesional sanitario si es necesario para que la técnica sea lo más estéril posible.**/No extraer muestras de Hemocultivos de catéteres intravenosos permanentes colocados con anterioridad mas de 48 horas pues existen muchas posibilidades de estén colonizados por bacterias y contaminan la muestra.**/Se puede obtener la muestra si la extracción coincide con la inserción del catéter con técnica aséptica.**/Si se obtiene la muestra con jeringa transferir la sangre a los frascos con la misma aguja de la venopunción. Diferentes estudios demuestran que el cambio de aguja no disminuye la contaminación de la muestra y aumenta el riesgo de pinchazo accidental
**/También podemos utilizar el sistema de recogida directa por vacío de doble aguja que nos permite la introducción de la sangre directamente en los frascos y al no existir manipulación disminuye el riesgo de contaminación.**/Examine los frascos de hemocultivo antes de usarlos por si presentan indicios de deterioro. Deseche aquel frasco en el que se observe turbidez, decoloración, fugas, tapón hinchado o hundido y en general cualquier alteración que nos haga sospechar de su buen estado.**/Desinfecte el tapón de caucho del bote de hemocultivo con antiséptico povidona yodada, dilución de clorhexidina o alcohol 70º y esperar a que se evapore para evitar la entrada en interior del frasco. No es necesario tapar los frascos con gasas y antiséptico pues quedan sellados tras la extracción de la aguja.**/Llenar los frascos suavemente haciendo resbalar la sangre para que no se produzca hemólisis pero sin demora para evitar que se coagule.**/Introducir la sangre atravesando el tapón con la aguja en posición vertical primero el bote anaerobio y después el aerobio, de forma que las burbujas de aire queden junto al embolo evitando así su paso al frasco.**/Remita la muestra al laboratorio de microbiología acompañada de un volante debidamente cumplimentado por el facultativo con el nombre del paciente, servicio, fecha y hora de la extracción, numero de orden de la muestra 1ª, 2ª o 3ª y si el paciente ya esta sometido a terapia antimicrobiana haga constar tipo de antibiótico, dosis y hora de la ultima administración.**/Identificar las muestras según protocolo rotulando los frascos o con etiquetas adhesivas.**/Utilizar el espacio disponible para la identificación evitando escribir sobre el código de barras o taparlo con las etiquetas. Esto impide su lectura y retrasa el procesamiento de la muestra. Además hay sistemas que disponen de códigos de barras duplicados adhesivos que se extraen de los frascos y se pegan en las peticiones para relacionarlas y que no haya confusión.**/Enviar al laboratorio de microbiología lo antes posible para su procesamiento y cada vez que se obtiene una muestra.**/Si no se pudiera enviar en ese momento o hubiera que esperar las otras tomas seriadas proteger de la luz pues la detección de microorganismos en algunos casos es por fluorescencia y podría falsear los resultados. Las muestras deben conservarse incubando en una estufa a 35-38ºC
TEMA I: GENERALIDADES DEL APARATO CIRCULATORIO. ELECTROCARDIOGRAMA:A.-ORGANIZACIÓN GENERAL Y FUNCIONAL DEL APARATO CIRCULATORIO:El aparato circulatorio está compuesto por una serie de vasos que forman un circuito cerrado (venas y arterias) y en este se intercala una bomba que es el corazón. Este circuito de vasos se compone de: ATERIAS: llevan sangre oxigenada, se ramifican en vasos más pequeños denominados capilares, se dirigen hacia todos los tejidos del organismo en donde se produce el intercambio (aportan nutrientes, hormonas), a nivel de los capilares se va a producir en intercambio de sustancias de desecho y gases (CO2). En este circuito cerrado hay una serie de vasos. La zona izquierda del corazón tiene sangre arterial (oxigenada), la zona derecha sangre venoso (no oxigenada.VENAS: traen la sangre de los tejidos. Ésta se dirigirá hacia el corazón para ser purificada .Por la arteria aorta y pulmonar, en reposos, saldrán 70 ml. El volumen de eyección de salida en reposo es de 70 ml.Trayecto general de la circulación:Circulación mayor:entre el corazon y los pulmones.-la sangre desoxigenada sale del ventriculo derecho y va alos pulmones x las arterias pulmonares,se oxigena y regresa x las venas pulmonares,se oxigena y regresa x las venas pulmonares hasta el ventriculo izq.Circulación menor:entre el corazon y los de+ organos y tejidos.-la sangre oxigenada sale del ventriculo izq x la arteria aorta y lleva a los organos O2 y nutrientes y vuelve al corazon x las venas q con fluyen en las venas cavas,asta la auricula derexa.Movimientos del corazón:Sístole: contracción ventricular -Diástole: relajación ventricular ..-.-.-La sangre que sale del ventrículo derecho irá a los pulmones para oxigenarse, la sangre que salga del ventrículo izquierdo se distribuirá:-El cerebro recibe un 15% de los 70 ml-Alrededor del 10% irá a la cabeza y ala extremidad superior-El aparato digestivo incluyendo el hígado, recibirá un 35%-Los riñones un 20%-El tronco y la extremidad inferior un 15%-Un 5% para el aporte sanguíneo de las arterias coronarias.-.-.-.-Existen tres órganos muy sensibles en cuanto al aporte de sangre, son los riñones, el cerebro y el propio corazón.B.-EL CORAZÓN:Las paredes de las aurículas están formadas por músculo cardíaco, son finas y delgadas. Entre estás, está el tabique interauricular.Sístole auricular: contracción de aurículas. La sangre pasa desde las aurículas hacia los ventrículos. La musculatura de los ventrículos es gruesa, está constituida por músculos cardiacos separados por un tabique interventricular. En la sístole se envía sangre desde el ventrículo izquierdo a todo el sistema a través de la aorta.Capas del corazón:Interna:endocardio, revestido por un endotelio.Medio:miocardio, paredes gruesas de músculo cardíaco.Exterior:pericardio, se divide en:-Pericardio visceral: pegado al corazón-Pericardio parietal.Entre estas dos, se deposita una fina película de líquido para que en las contracciones del corazón se evite el rozamiento.Válvulas del corazón: las válvulas sirven para que la sangre circule en una direcciónAurícula ventricular: separa la aurícula del ventrículo. Está compuesta por una válvula situada en el lado derecha denominada tricúspide (compuesta por tres valvas), y otra en la mitad del lado izquierdo con 2 valvas. Están sujetas por cuerdas tendinosas denominadas músculos papilares, situadas hacia el interior de los ventrículos.Válvulas sigmoideas semilunares: poseen tres valvas, están situadas a la salida de la arteria aorta y pulmonar. Se abren y cierran al mismo tiempo.C.-SISTEMA DE CONDUCCIÓN DE LA EXCITACIÓN AUTOMATISMO CARDIACO El corazón está formado por músculo estriado, posee la propiedad de ser excitable y contráctil, y sirve para que la contracción-excitación se produzca a la vez. Tiene la particularidad del automatismo cardíaco, es la capacidad corazón de generar sus propios estímulosZonas marcapasos:Nodo sinusal: situado en la pared de la aurícula derecha cercano a la desembocadura de la cava superior. Tiene entre 70-80 despolarizaciones en 1 min. Es el marcapasos fisiológicoNodo aurículo-ventricular: situado entre la aurícula y el ventrículo, un poco ladeado a la derecha. Son distintas del resto, son zonas marcapasos porque su potencial de reposo o de membrana no es estable, es más bien ondulante. Tiene entre 40-50 despolarizaciones en 1 min.Sistema de conducción de la excitación: una de las 70 despolarizaciones, excita a las aurículas (desde l nodo sinusal). A continuación se transmite la excitación hasta la zona del nodo aurículo-ventricular y de éste saldrán dos haces:-El haz de Hiss (derecho) que conduce hacia la punta del corazón -La rama izquierda Posteriormente por las fibras de Purkinge se lleva la excitación hacia los laterales ventriculares.