Capítulo 34: Hongos

Reproducción:

Basada en la formación de esporas, estas esporas generalmente son del tipo Angiospora en sus diferentes modalidades como:

• Esporangiospora
• Conidiospora
• Artrospora
• Blastospora

Cuando tenemos un crecimiento micelial, es decir, un moho filamentoso, con el tiempo vamos a esperar que estos hongos o mohos den su producto, que es la espora. Muchos casos de micosis han sido identificados al observar el hongo a través de su espora.

Diagnóstico Micológico

Tenemos una lesión, una dermatomicosis que supuestamente se trate de una micosis. Sin embargo, no toda lesión a nivel de la piel tiene que ser micosis, hay otras patologías, otras gnoseologías que causan ese tipo de lesión.

Entonces, lo que el médico en primer lugar debe hacer es basarse en su clínica, que consiste en la observación. El médico primero debe observar, no solo preguntar qué tiene o qué le duele al paciente. El médico tiene que auscultar, entonces, a través de esa clínica se sospecha que puede ser tal cosa y para confirmarlo se realiza la anamnesis (preguntar al paciente).

Sospecha de micosis, mancha redonda rojiza ¿Qué debe hacerse?

Primero, desinfectar el área lesionada, limpiar y después recién obtener la muestra. Si es lesión circular se debe hacer un raspado con una hoja de bisturí esterilizada en la zona lesionada, en la periferia donde está rojiza la zona, donde hay inflamación, donde hay actividad del hongo. Si hay inflamación es que hay actividad. Con la hoja de bisturí se raspa sin hacer que sangre la herida. Ese raspado se coloca en una lámina portaobjetos y se coloca una gota de hidróxido de potasio al 20 o 40% y se cubre con una lámina cubreobjetos.

Hecho esto, se lleva al microscopio y se trata de buscar hifas, buscar en lo posible esporas, pero mayormente se buscan hifas. Cuando hay hifas significa que hay hongos, ahora la sospecha del hongo fue confirmada. Con esa hifa no se puede identificar al hongo. Se debe realizar un cultivo, en este caso se utiliza agar Sabouraud. Se toma el raspado y se siembra, con el tiempo el hongo va a crecer. La mayoría de los hongos tienen los mismos colores, la misma forma de crecimiento y microscópicamente no se puede identificar.

Una forma preliminar para identificar la especie del hongo es dejarlo crecer y esporular, es decir, que se formen sus esporas. Una vez que el hongo ha formado su espora, para observar esas hifas se corta una tira de cinta adhesiva y con eso se va a la placa y con la parte pegajosa se adhiere a la superficie del hongo, se pegan las esporas, se coloca en una lámina, y a esa lámina se agrega azul de lactofenol o azul de Tripan, cualquiera de los dos, una gota y sobre ello se pega la cinta adhesiva que entró en contacto con las esporas. Se trata de uniformizarlo que no haya espacios y burbujas debido a que el azul de Tripan es líquido.

Al llevarlo al microscopio:

• El sembrado es el MACROCULTIVO.
• Es importante también buscar el TIPO DE HIFA (que significa que hay moho), luego para identificarlo con el MICROCULTIVO (consiste en una placa con agar Sabouraud, con un bisturí se hacen cortes en el agar).
• Tenemos una lámina portaobjeto esterilizada, quitamos un pedazo (cuadradito y lo colocamos a otro lado).
• El MICROCULTIVO, con un asa de Kolle en gancho, como es patógeno, se hace en una cámara de cultivo, frente a la llama de un mechero y con anteojos.
• Con el asa previamente flameada, se saca una pequeña porción del micelio que está creciendo, se siembra en otra placa, en las 4 esquinas (lo que estamos sacando es la espora, acá otro y así sucesivamente, colocando la espora). Sobre ese pedacito de agar Sabouraud también se cubre con una lámina.
• El cultivo, en una placa Petri que tiene una varilla doblada con un vidrio adentro, sobre ello lo coloco en el agar, esta placa debe tener una atmósfera temperada, entonces se utiliza agua destilada estéril. Si en caso de tratar de llevar se inclina y el agua se rebalsa (antes de colocar la varilla se coloca un papel toalla humedecido con agua y después se tapa).
• Se deja incubando a 25-28-30°C (rango de temperatura condición ambiental) para que crezca el micelio del hongo.
• El micelio del hongo va a crecer y los micelios van a crecer por todo el borde del medio de cultivo, y también sus esporas. Ese crecimiento dura aproximadamente 2 semanas: en la laminilla.
• Cogemos la laminilla por un lado y cuidadosamente se procederá a desprender el medio de cultivo, para llevarlo todo pegado a la laminilla. En otra lámina colocamos una gota de azul de lactofenol y sobre ella colocamos la laminilla.
• Con la acción del lactofenol todo se va a dispersar y lo va a teñir (hifas y esporas).
• Para que no se resequen estas laminillas las sellamos con esmalte. Y con clave taxonómica.
• Luego ver al microscopio el tipo de espora, de micelios, o buscar en la clave taxonómica.
• Dermatofitos con frecuencia forman: macroconidias.
• Cocos: microconidias.
• Luego de identificar al hongo, se continúa con la lesión, se probarán los antimicóticos ya probados (no se ve con el antibiograma). Solo se ve presencia o ausencia.