1. Cromatografía

Es un método de separación que aprovecha las diferencias en el comportamiento de partición entre una fase móvil y una fase estacionaria para separar los componentes de una mezcla.

Columna

Mantiene la fase estacionaria.

Fase Móvil

Transporta la muestra. Los componentes de la muestra que particionan con la fase estacionaria estarán más tiempo dentro de la columna. Si es en columna, conforme los componentes son eluidos de la columna, pueden ser cuantificados por un detector y colectados para análisis posterior.

Métodos Cromatográficos

• De gases
• Capa fina
• Líquidos inmovilizados
• Exclusión molecular
• Intercambio iónico
• Hidroxiapatita
• Hidrofóbica
• Afinidad
• HPLC

HPLC

Cromatografía líquida de alta resolución.

Limitaciones de la Cromatografía a Bajas Presiones

• Imposibilidad física de aumentar el flujo
• Resinas compresibles
• Corrida de muchas horas
• Grandes volúmenes

Descubrimientos que Facilitaron la HPLC

• Síntesis de resinas incompresibles
• Nuevas técnicas en el empaque de las columnas
• Microparticulación de las resinas
• Adelantos en la tecnología espectrofotométrica

Tipos de HPLC

• Exclusión molecular
• Intercambio iónico
• Hidrofóbica
• Afinidad
• De fase reversa

Instrumentación

Sistema de bombeo, resistente a químicos, poca variabilidad, presiones de 30 a 400 atm, flujo constante (libre de pulsos), buen mezclado de los solventes, reproducibilidad en la formación de los gradientes.

Tipos de Bombas

• Jeringa
• Pistón recíproco
• Diafragma presión constante

Detectores

• Detectores de UV-Visible que pueda leer 2 o más longitudes de onda al mismo tiempo.
• Detector de arreglo de diodos. Espectro de 200 a 600 nm. En menos de 1 seg.

Termostato de la columna: celda micropore, celda analítica, celda preparativa, manejador de solvente, manejador de muestras.

2. Control Microbiológico

Es parte esencial de las buenas prácticas de manufactura, antibacterianos, productos estériles y pirógenos.

Objetivo

Detectar pirógenos, hongos, bacterias, levaduras, toxinas microbianas, filamentos.

Finalidad

Evaluar, cuantificar, materia prima en proceso, producto terminado.

Niveles de Acción

• Entorno a la forma farmacéutica: ambiente, agua, personal.
• Forma farmacéutica propiamente dicha: potencia, límite, esterilidad.

Control Microbiológico del Ambiente de Trabajo

Aire, ambiente + medidas de protección = operaciones de fabricación con mínimo riesgo de contaminación.

Ambiente de Trabajo

• Áreas de contaminación controlada:
  • M1 ambiente 100
  • M2 ambiente 10.000
  • M3 ambiente de 100.000

3. Control Microbiológico del Ambiente de Trabajo

Técnica por Sedimentación

Agar T y S, agar Sabouraud = incubar.

Técnica por Impacto

Agar T y S, agar Sabouraud = incubar.

Control Microbiológico del Ambiente de Trabajo

Superficie, hisopeado, impregnado, enjuague.

Control Microbiológico del H₂O

• Resina de intercambio iónico = impurezas.
• Contaminantes más peligrosas = Pseudomonas.

Características organolépticas, fisicoquímicas, sustancias no deseables, agentes desinfectantes.

Análisis para Gérmenes Patógenos

Límite microbiológico: coliformes totales, coliformes fecales, estreptococos, Clostridium, sulfitoreductor. Todo debe ser cero.

Clasificación del Agua

Agua potable, purificada e inyectables.

Control Personal de Trabajo

Antes, durante y después; examen médico. Deben estar debidamente instruidos: medidas de sanidad, higiene.

Partículas

Diariamente existe una liberación de partículas mayor a 10 millones: superficie de la piel 1.75 m²

4. Determinación de Potencia Antibacteriana

Valoración microbiológica de antibacterianos, eficacia terapéutica.

Eficacia Terapéutica del Antibacteriano

Efecto inhibitorio sobre el desarrollo de un microorganismo y esa actividad microbicida puede compararse en igualdad de condiciones con el patrón del mismo antibacteriano.

Determinación de la Potencia Antibacteriana

• Método cilíndrico placa = difusión.
• Método de tubo turbidimétrico = intensidad de luz.

Pruebas de Esterilidad

Aplicada a productos terminados no garantiza la esterilidad total del lote = muestreo no selectivo. En el caso de soluciones o envases de gran volumen (50 ml) envases totales, filtración por membrana.

BPM-FDA

Las contaminantes más peligrosas son los materiales de baja dosis y los sensibilizantes como penicilina en proceso: polvos, gomas, gases, sprays.

En Todo Control Microbiológico

Evitar la contaminación cruzada de cualquier tipo, es una meta deseable y en algunos países como USA y Europa es un objetivo que debe cumplirse con rigurosidad para: beta lactámicos, cefalosporinas.

FDA

No trazas de penicilina en el área, si 0,05 U.I de penicilina en inyectable; 0,5 U.I en fármacos orales.

5. Droga Formulación

Estabilidad química y física.

Estabilidad Física

Precipitado, cambios de solubilidad, velocidad de disolución, separación de fases en las emulsiones; aparentemente inofensivos – efectividad terapéutica.

Propiedades Físicas Medibles

Tiempo, temperatura, otro factor de modificación. Parámetros factibles, método cinético, estabilidad.

Emulsiones

Tensión superficial (cohesión) + interfacial (adhesión) = coeficiente de difusión. Alta adhesión, baja cohesión, coeficiente de difusión positivo, estabilidad mala.

Estabilidad Física de Suspensiones

Viscosidad, pH, velocidad de sedimentación, altura de sedimento.

Comprimidos

Bajo nivel sanguíneo de p.a, alto tiempo de desintegración, alta velocidad de disolución.

Solución y Suspensión

Transparencia y color, pH, esterilidad, suspendibilidad, tamaño y forma de las partículas, estabilidad de los conservantes.

Cremas, Ungüentos y Supositorios

Viscosidad, homogeneidad, pH, forma cristalina, tamaño de partículas, estabilidad de conservadores, solubilidad Lip/agua, punto de fusión, apariencia.

Comprimidos y Cápsulas

Friabilidad, tiempo de desgregación, tiempo de disolución, dureza, aspecto.

Envases

Migración, penetración de humedad, cambios en la naturaleza del envase, aspecto.

Vitamina A

Ultravioleta e infrarrojo, espectroscopia y resonancia, BHT quinina.

Mano 100-1000/cm²
Frente 10.000-100.000/cm²
Cuero cabelludo 1.000.000/cm²
Axilas 1-10 millones/cm²
Secreción nasal 10 millones/g
Saliva 100 millones/g